کلونینگ و توالی یابی ژن m2 از ویروس a آنفولانزا سویه h9n2 وانتقال آن به وکتور بیانی pegfp-n1

thesis
abstract

چکیده بارزترین نقش پروتئین m2 در ویروس a آنفولانزا ایجاد یک کانال یونی یکطرفه برای عبور h+ به درون ویروس می باشد. این قابلیت در اسیدی شدن محتویات ویروس و رها سازی ژنوم آن به درون سیتوپلاسم میزبان نقش داشته و امری حیاتی برای تکثیر ویروس به شمار می رود. بر اساس شواهد، انسداد این کانال از تأثیر ویروس بر سلول میزبان جلوگیری کرده و مانع بیماریزایی آن می شود. با توجه به اهمیت این پروتئین کانالی در ارائه راه کارهای جدید برای مقابله با انواع ویروسهای a آنفولانزا که بسیاری از جمعیتهای حیوانی و انسانی را تهدید می کنند، این تحقیق سعی دارد تا با توالی یابی ژن مسئول سنتز این پروتئین چشم اندازروشنی را برای تولید آنتی بادی ها و داروهای جدید محدود کننده این ویروس ایجاد کند. در این تحقیق سعی شده است تا میزان بالای حفظ توالی (sequence conservation) ژنی، از طریق مقایسه توالی ژن m2ای که از یک ویروس a آنفولانزا با نام علمی a/chicken/iran/101/1998(h9n2) استخراج شده است با دیگر توالی هایی از این ژن که در تحت تیپهای متداول این ویروس در سطح جهان وجود دارند، نشان داده شود. همین امر نقش آنتی ژنی این پروتئین را نسبت به دیگر آنتی ژنهای معروف این ویروس که هر ساله دچار تغییر می شوند و نسبت به داروهای مهار کننده مقاومت نشان می دهند، دو چندان می کند. کلون این ژن به کمک وکتور متعارف pqz57rt که نوعی taوکتور بی نیاز از آنزیم برشی است، در سویه dh5? از باکتری ای کولی انجام پذیرفت. این روش چنانچه باکتریهای کلون شده در شرایط انجماد استاندارد قرار بگیرند امکان نگهداری نامحدود کلونیها را فراهم می کند و از طرفی تکثیر مجدد باکتریها و استخراج ژن از آنها را به سادگی امکان پذیر می سازد. در انتها نیز با انتقال این ژن به یک وکتور دیگر بنام pegfp-n1 که نوعی وکتور بیانی است و قادر به ترجمه ژن در سلولهای پستانداران می باشد، مقدمات لازم برای تولید پروتئین این ژن ایجاد گردید.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

بیان ژن m_2 از ویروس آنفلوآنزا تیپ h9n2)a ) بر روی رده سلولی ct26 به کمک وکتور یوکاریوتی pegfp-n1

چکیده: همه گـیری آنـفلوآنزا یکی از بزرگترین عوامل تهدید کننده سلامت در انـسان و حیوان به شمار می آید. دو همه گیری بزرگ از سویه های ویروس آنفلوآنزا h5n1 وh1n1 در طول سال های اخیر منجر به توجه بیشتر به ویروس سبب شونده و اجزاء پروتئین های عمده ویروس شده است. در این مطالعه، ما برای بیان پروتئین m2 از ویروس آنفلوآنزا نوع a در لاین سلولیct-26 بوسیله وکتور پلاسمیدی pegfp-n1 تلاش نمودیم و سپس ما شر...

15 صفحه اول

کلونینگ تعیین توالی ژن m2e ویروس آنفلوآنزای تیپ a سوش ( h9n2 ) به همراه ژن hsp70(c-ter)مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در شاتل وکتور بیانی غیر ترشحی ppiczb

یکی از دلایل استفاده از پروتئین m2e برای ساخت واکسن آنفلوانزا a توانایی منحصر به فرد آنهاست. از این رو برای افزایش مقاومت و ایمنی یک راه موثر مصون باقی ماندن پروتئین m2e است. به نظر می رسد که ما می توانیم با اتصال این m2e-peptide به یک ناقل مناسب مانند hsp70(c-ter) مایکوباکتریوم توبرکلوزیس آن را مقاوم کنیم. بنا بر گزارشات قبل ،این تحقیق در نظر دارد از ترکیب پروتئین m2e از ویروس آنفلوانزا a با ...

15 صفحه اول

کلونینگ ژن پروتئین F ویروس نیوکاسل و تعیین توالی آن

ویروس عامل بیماری نیوکاسل (NDV) یکی از مهمترین عوامل بیماری های ویروسی طیور می باشد ، که سبب واگیری و مرگ ومیر شدید در طیور و گونه های متعددی از پرندگان می شود.پروتئین F ویروس جهت نفوذ و تکثیر ویروسی در حیوانات آلوده نقش محوری دارد. کلونینگ و بیان ژنوم کد کننده پروتئین F جهت تولید واکسن تحت واحد و همجچنین تولید آنتی بادی مونوکلنال علیه پروتئین F می تواند گتمهای جدیدیبرای شناسایی و پیشگیری از بی...

full text

طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن Vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (HIV) با استفاده از وکتور EGFP-N1

Background and purpose: The purpose of this study was to design a recombinant vector pEFGP- N1 containing the full length of HIV-1Vpr gene. To the best of our knowledge, the cloning of Vpr gene in pEGFP_N1 is not previously done. Materials and methods: As a source of Vpr gene the pUC19-Vpr recombinant vector was confirmed by digestion with restriction enzymes BglII and NotI in order to separ...

full text

جداسازی ژن rgt2ازمخمر saccharomyces cerevisiae سویه ی ایرانی و کلونینگ آن در وکتور بیانی مخمر

تکنولوژی تولید بیوفیول ها یا سوخت های زیستی به خاطر تامین انرژی، ایمن بودن و پایداری به سرعت در حال رشد می باشد. اولین تکنولوژی تولید بیوفیول در مقیاس صنعتی، مربوط به تولید بیواتانول بوده است. مخمر saccharomyces cerevisiae از جمله مهمترین میکروارگانیسم ها برای تولید اتانول است و از طریق تخمیر الکلی باعث تولید اتانول می شود. این به دلیل کارایی بالای این موجود در جذب و تخمیر قندهای هگزوز از جمله ...

15 صفحه اول

بررسی توالی ژن M2 ویروس‌های آنفولانزا جداشده از بیماران ایرانی در سال 1393 به‌منظور تعیین مقاومت به آدامانتان‌ها

Background and Objective: Adamantanes, amantadine, and rimantadine have been used for many years for prevention and treatment of influenza virus A infections. These drugs are influenza virus M2 protein inhibitors and some amino acids substitutions in transmembrane portion of this protein cause resistance to them. This study was done for survey of adamantane resistance related nucleotide sequenc...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان البرز - دانشکده کشاورزی

Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023